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調(diào)試紫外可見分光光度計(jì)是使用前很重要的細(xì)節(jié)

更新時(shí)間:2025-10-21點(diǎn)擊次數(shù):306
  以下是紫外可見分光光度計(jì)的標(biāo)準(zhǔn)調(diào)試流程,涵蓋關(guān)鍵步驟及技術(shù)要點(diǎn),旨在確保儀器處于最佳工作狀態(tài)并保障測(cè)量準(zhǔn)確性:
  一、開機(jī)預(yù)熱與初始化
  通電預(yù)熱:接通電源后開啟主機(jī),預(yù)熱至少30分鐘,使氘燈/鎢燈達(dá)到熱平衡,電子系統(tǒng)穩(wěn)定。
  自檢程序:?jiǎn)?dòng)配套軟件,執(zhí)行儀器自檢功能,確認(rèn)光源、單色器、檢測(cè)器及驅(qū)動(dòng)電機(jī)工作正常。若提示故障代碼,需針對(duì)性排查(如更換損壞燈泡或修復(fù)電路連接)。
  環(huán)境控制:調(diào)節(jié)實(shí)驗(yàn)室溫度至25±2℃,濕度≤60%,避免冷凝水影響光學(xué)元件性能。
  二、波長(zhǎng)校準(zhǔn)
  方法一:標(biāo)準(zhǔn)濾光片法
  選用認(rèn)證濾光片:插入已知特征吸收峰的標(biāo)準(zhǔn)濾光片(如鈥玻璃濾光片),其標(biāo)稱值與實(shí)測(cè)值偏差應(yīng)<±0.5nm。
  自動(dòng)校正:運(yùn)行波長(zhǎng)校準(zhǔn)程序,儀器自動(dòng)掃描并定位濾光片的特征吸收峰,修正單色器波長(zhǎng)刻度。
  注意:若多次校準(zhǔn)仍超差,需清潔單色器內(nèi)部鏡面或調(diào)整狹縫寬度。
  方法二:鐠釹濾光片雙峰校驗(yàn)
  高精度驗(yàn)證:使用含Pr-Nd元素的復(fù)合濾光片,其在特定波長(zhǎng)處有兩個(gè)尖銳吸收峰,可同步檢驗(yàn)波長(zhǎng)重復(fù)性和分辨率。
  三、吸光度校準(zhǔn)
  零點(diǎn)校正(暗電流扣除)
  空白對(duì)照:樣品倉放入匹配的參比池(盛裝溶劑或空白溶液),關(guān)閉樣品室蓋,執(zhí)行“校零”操作,消除暗電流及雜散光干擾。
  能量平衡:調(diào)整光電倍增管電壓,使參比狀態(tài)下透光率為100%T(對(duì)應(yīng)吸光度A=0)。
  標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定
  配制標(biāo)準(zhǔn)品:選用硝酸鉀溶液(KNO?)或重鉻酸鉀溶液(K?Cr?O?),按藥典要求精確配制。
  多點(diǎn)校準(zhǔn):在不同波長(zhǎng)下測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算回歸系數(shù)R²應(yīng)>0.999。若偏離,需檢查比色皿配對(duì)性及溶液純度。
  四、基線平直度測(cè)試
  全波段掃描:以空氣或空白溶劑為參比,在200-800nm范圍內(nèi)進(jìn)行全波長(zhǎng)掃描,觀察基線漂移量。
  合格標(biāo)準(zhǔn):基線波動(dòng)幅度應(yīng)<±0.002Abs,否則需清洗比色皿、更換干燥劑或檢修檢測(cè)器。
  五、樣品測(cè)試驗(yàn)證
  實(shí)際樣品測(cè)試:選取已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液(如硫酸銅溶液),在最大吸收波長(zhǎng)處連續(xù)測(cè)量5次,計(jì)算RSD值應(yīng)<0.5%。
  重復(fù)性檢驗(yàn):同一溶液反復(fù)進(jìn)樣測(cè)量,吸光度極差應(yīng)<0.003Abs,反映儀器穩(wěn)定性。
  通過上述系統(tǒng)化調(diào)試,可確保紫外可見分光光度計(jì)的波長(zhǎng)準(zhǔn)確度、吸光度線性及基線穩(wěn)定性滿足GB/T 17681-202X標(biāo)準(zhǔn)要求。日常使用中需注意避免強(qiáng)光直射樣品室,定期進(jìn)行性能驗(yàn)證,以保證檢測(cè)結(jié)果的可靠性。
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